Estandarización y evaluación del desempeño de un inmunoensayo para la detección de anticuerpos contra el dominio de unión a receptor de la proteína de espícula del virus SARS-CoV-2

Autores/as

DOI:

https://doi.org/10.51481/amc.v65i4.1355

Palabras clave:

SARS CoV-2, COVID-19, anticuerpos, inmunoensayo, ensayo de inmunoadsorción enzimática

Resumen

Objetivo: Establecer un inmunoensayo semicuantitativo para la detección de anticuerpos contra el dominio de unión al receptor de la proteína de espícula del coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave tipo 2 y la evaluación de su desempeño como herramienta de apoyo diagnóstico.

Métodos: Se generó una proteína recombinante del dominio de unión a receptor de la proteína de espícula del coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave tipo 2. Dicha proteína se empleó como sustrato antigénico en la estandarización de dos ensayos semicuantitativos por inmunoadsorción ligados a enzima para la detección de inmunoglobulinas M e inmunoglobulinas G humanas. Se utilizó un conjunto de muestras de suero positivas (n=129), provenientes de donantes voluntarios con infección previa por el virus SARS-CoV-2, confirmada mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa reversa, y tomadas entre agosto de 2020 y noviembre de 2021. Además, se empleó un panel de muestras prepandémicas negativas (n=196) obtenidas antes de diciembre de 2019 para la evaluación del desempeño de los ensayos; se recibieron muestras múltiples seriadas de 99 donantes voluntarios para examinar la respuesta de la prueba ante la seroconversión y se estudió la posible asociación entre las seropositividades por coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave tipo 2 y por el virus del dengue para la evaluación de reacciones cruzadas inespecíficas.

Resultados: El ensayo de detección de inmunoglobulina G mostró 81.4 % de sensibilidad, 86.2 % de especificidad y valores predictivos positivos y negativos de 79.5 % y 87.6 % respectivamente. Por su parte, el ensayo de detección de inmunoglobulina M mostró solamente 72.1 % de sensibilidad, 54.1 % de especificidad y valores predictivos positivos y negativos de 25.6 % y 89.8 % respectivamente. No se encontraron diferencias significativas entre las mediciones semicuantitativas según sexo ni correlación lineal entre esta variable y la edad. Los valores obtenidos para el inmunoensayo presentaron diferencias significativas según el autorreporte de presencia o ausencia de síntomas compatibles con COVID-19. No se encontró correlación entre las seropositividades contra el coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave tipo 2 y el virus del dengue. El ensayo de detección de inmunoglobulina G generó valores inferiores pero constantes en muestras de donantes voluntarios que autorreportaron no haber tenido contacto con el virus SARS-CoV-2. En contraste, las muestras de donantes expuestos al virus SARS-CoV-2 mostraron valores elevados pero variables en magnitud. Además, se observaron valores elevados y variables en muestras de voluntarios vacunados o con infección previa.

Conclusiones: Nuestro ensayo de detección de inmunoglobulina M presenta escaso valor diagnóstico. Por el contrario, el ensayo de detección de inmunoglobulina G muestra un rendimiento satisfactorio y se apega al comportamiento reportado para este tipo de prueba según las características demográficas y clínicas de los usuarios; por lo tanto, este ensayo podría ser empleado como herramienta fiable y práctica en aplicaciones clínicas y como apoyo al diagnóstico. Es necesario desarrollar más estudios sobre reacciones cruzadas entre los anticuerpos contra el coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave tipo 2 con aquellos de otras entidades de interés clínico, sobre todo las presentes en países tropicales como el nuestro.

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Citas

Gorbalenya AE, Baker SC, Baric RS, de Groot RJ, Drosten C, Gulyaeva AA, et al. The species Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus: classifying 2019-nCoV and naming it SARS-CoV-2. Nat Microbiol. 2020; 5: 536–44. DOI: 10.1038/s41564-020-0695-z

Zhang H, Du F, Cao XJ, Feng XL, Zhang HP, Wu ZX, et al. Clinical characteristics of coronavirus disease 2019 (COVID-19) in patients out of Wuhan from China: a case control study. BMC Infect Dis. 2021; 21: 207. DOI: 10.1186/s12879-021-05897-z

Hanson KE, Caliendo AM, Arias CA, Hayden MK, Englund JA, Lee MJ, et al. The Infectious Diseases Society of America Guidelines on the Diagnosis of COVID-19: Molecular Diagnostic Testing. Clin Infect Dis. 2021; 22: ciab048. DOI: 10.1093/cid/ciab048

Wikramaratna PS, Paton RS, Ghafari M, Lourenço J. Estimating the false-negative test probability of SARS-CoV-2 by RT-PCR. Euro Surveill. 2020; 25: 2000568. DOI: 10.2807/1560-7917.ES.2020.25.50.2000568

Zou L, Ruan F, Huang M, Liang L, Huang H, Hong Z, et al. SARS-CoV-2 Viral Load in Upper Respiratory Specimens of Infected Patients. N Engl J Med. 2020; 382: 1177–9. DOI: 10.1056/nejmc2001737

Long QX, Liu BZ, Deng HJ, Wu GC, Deng K, Chen YK, et al. Antibody responses to SARS-CoV-2 in patients with COVID-19. Nat Med. 2020; 26: 845–8. DOI: 10.1038/s41591-020-0897-1

Yongchen Z, Shen H, Wang X, Shi X, Li Y, Yan J, et al. Different longitudinal patterns of nucleic acid and serology testing results based on disease severity of COVID-19 patients. Emerg Microbes Infect. 2020; 9: 833–6. DOI: 10.1080/22221751.2020.1756699

Ojeda DS, Gonzalez Lopez Ledesma MM, Pallarés HM, Costa Navarro GS, Sanchez L, Perazzi B, et al. Emergency response for evaluating SARS-CoV-2 immune status, seroprevalence and convalescent plasma in Argentina. PLoS Pathog. 2021; 17: e1009161. DOI: 10.1371/journal.ppat.1009161

Yassine HM, Al-Jighefee H, Al-Sadeq DW, Dargham SR, Younes SN, Shurrab F, et al. Performance evaluation of five ELISA kits for detecting anti-SARS-COV-2 IgG antibodies. Int J Infect Dis. 2021; 102: 181–7. DOI: 10.1016/j.ijid.2020.10.042

Amanat F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. A serological assay to detect SARS-CoV-2 seroconversion in humans. Nat Med. 2020; 26: 1033–6. DOI: 10.1038/s41591-020-0913-5

Arias-Arias JL, Molina-Castro SE, Monturiol-Gross L, Lomonte B, Corrales-Aguilar E. Stable production of recombinant SARS-CoV-2 receptor-binding domain in mammalian cells with co-expression of a fluorescent reporter and its validation as antigenic target for COVID-19 serology testing. Biotechnol Rep (Amst). 2023; 37: e00780. DOI: 10.1016/j.btre.2022.e00780

Subedi GP, Johnson RW, Moniz HA, Moremen KW, Barb A. High Yield Expression of Recombinant Human Proteins with the Transient Transfection of HEK293 Cells in Suspension. J Vis Exp. 2015; 106: e53568. DOI: 10.3791/53568

Lee Lui M, Alfaro Alvarado J, Quesada Johnson A, Taylor Castillo L, Hun Opfer L. Prevalencia de anticuerpos contra virus dengue en el cantón de Golfito (2005) y en el Distrito Central de Puntarenas (2005-2006), Costa Rica. Acta Med Costarric. 2008; 50: 147–52. DOI: 10.51481/amc.v50i3.378

Wickham H, Averick M, Bryan J, Chang W, McGowan L, François R, et al. Welcome to the Tidyverse. J Open Source Softw. 2019; 4: 1686. DOI: 10.21105/joss.01686

Heffernan E, Kennedy L, Hannan MM, Ramlaul N, Denieffe S, Courtney G, et al. Performance characteristics of five SARS-CoV-2 serological assays: Clinical utility in health-care workers. Ann Clin Biochem. 2021; 58: 496–504. DOI: 10.1177/00045632211012728

Kulkarni R, Shrivastava S, Patil HP, Kore P, Rane P, Palkar S, et al. Performance assessment of SARS-CoV-2 IgM & IgG ELISAs in comparison with plaque reduction neutralization test. Indian J Med Res. 2021; 153: 658–64. DOI: 10.4103/ijmr.ijmr_3806_20

Chansaenroj J, Yorsaeng R, Posuwan N, Puenpa J, Sudhinaraset N, Chirathaworn C, et al. Detection of SARS-CoV-2-specific antibodies via rapid diagnostic immunoassays in COVID-19 patients. Virol J. 2021; 18: 52. DOI: 10.1186/s12985-021-01530-2

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Publicado

2024-04-20

Cómo citar

Jiménez-Salas, J. M., Murillo, T., Arias-Arias, J. L., & Corrales-Aguilar, E. (2024). Estandarización y evaluación del desempeño de un inmunoensayo para la detección de anticuerpos contra el dominio de unión a receptor de la proteína de espícula del virus SARS-CoV-2. Acta Médica Costarricense, 65(4), 1–12. https://doi.org/10.51481/amc.v65i4.1355