Diagnóstico molecular de cromosomopatías fetales en Costa Rica

Autores/as

  • Wendy Malespín Bendaña Universidad de Costa Rica
  • Fernando Ortiz Morales Universidad de Costa Rica
  • Isabel Castro-Volio Universidad de Costa Rica

DOI:

https://doi.org/10.51481/amc.v51i4.484

Palabras clave:

diagnóstico prenatal, Costa Rica, trisomía, cromosoma 13, cromosoma 18, cromosoma 21

Resumen

Justificación y objetivos: En Costa Rica, el diagnóstico de anomalías cromosómicas fetales se realiza solo mediante el análisis citogenético convencional de cromosomas obtenidos de cultivos celulares. Además de que la espera por los resultados puede ser larga, con alguna frecuencia fracasa el cultivo, por contaminación o por mala calidad de la muestra, o las figuras mitóticas no se pueden analizar, por lo que es necesario disponer de una metodología sencilla y barata, para obtener un diagnóstico prenatal rápido y fiable de trisomía 21, 18 ó 13, en embarazos de alto riesgo genético sometidos a amniocentesis o cordocentesis.

Métodos: Se diseñaron tres PCRs multiplex para amplificar cuatro distintas repeticiones cortas en tándem, de cada uno de los cromosomas 21, 18 y 13. Se colectaron 93 muestras (88 líquidos amnióticos y 5 sangres fetales), recibidas en el laboratorio entre 2006 y 2008, con solicitud de análisis cromosómico. Los resultados de la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa fluorescente, fueron comparados con el cariotipo obtenido de las mismas muestras para demostrar la fiabilidad del ensayo

Resultados: Para este grupo de datos, la exactitud del ensayo fue del 100% y se consiguió obtener resultados en 48 horas. Se logró realizar el análisis de repeticiones cortas en tándem en el 77% de las muestras en las que no se pudo obtener crecimiento celular.

Conclusión: La reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa fluorescente demostró ser una metodología sencilla, fiable y rápida, por lo que podría convertirse en una herramienta complementaria del análisis cromosómico convencional. La obtención de resultados rápidos en casos de diagnóstico prenatal podría disminuir el periodo de ansiedad parental por la espera de los resultados, así como permitir un mejor abordaje terapéutico de los fetos afectados.

Citas

Castro-Volio I, Sander K, Vargas M, Sánchez L, Escalante G. Cariotipos fetales en embarazos de alto riesgo genético provenientes de hospitales de la seguridad social y de la consulta privada, de 1993 a 1998. Acta méd costarric 2000; 2: 25-30.

Wolfe K, Herrington C. Interphase cytogenetics and pathology: a tool for diagnosis and research. J Pathol 1997; 181:359–61.

Pergament E. New molecular techniques for chromosome analysis. Clin Obstetr Gynecol. 2000; 14: 677-690.

Wachtel S, Tharapel A. FISH and PRINS: competing or complementary technologies? Am J Med Genet. 2002; 107: 97–98

Findlay I, Matthews P, Toth T, Quirke P. Same day diagnosis of Down’s syndrome and sex in single cells using multiplex fluorescent PCR. J Clin Pathol Mol Pathol. 1998; 51:164–167

Pertl B, Kopp S, Kroisel PM, Häusler M, Sherlock J, Winter R et al. Quantitative fluorescence polymerase chain reaction for the rapid prenatal detection of common aneuploidies and fetal sex. Am J Obstet Gynecol. 1997; 177:899-906.

Verma L, Mcdonald F, Leedham P, McConachie M, Dhanjal S, Hulten M. Rapid and simple prenatal DNA diagnosis of Down’s syndrome. Lancet. 1998; 352:9–12.

Levett L, Liddle S, Meredith J. A large-scale evaluation of amnio-PCR for the rapid prenatal diagnosis of fetal trisomy. Ultrasound Obstet Gynecol. 2001; 17:115–8.

Leung W, Lau E, Lao T, Tang M. Can Amnio–polymerase chain reaction alone replace conventional cytogenetic study for women with positive biochemical screening for fetal Down syndrome? Obstet. Gynecol. 2003; 101: 856-861.

Nicolini U, Lalatta F, Natacci F, Curcio C, Bui T. The introduction of QF-PCR in prenatal diagnosis of fetal aneuploidies: time for reconsideration. Hum Reprod Up. 2004; 10: 541-548.

Ochshorn Y, Bar-Shira A, Jonish A, Yaron Y. Rapid prenatal diagnosis of aneuploidy for chromosomes 21, 18, 13, and X by quantitative fluorescent polymerase chain reaction. Fetal Diagn Ther 2006; 21:326–331.

Mann K, Ogilvie C, Donaghue C, Mountford T, Mcanulty C, Warner I et al. QF-PCR for the diagnosis of aneuploidy. ACC Best practice Guidelines. Association for Clinical Cytogenetics. General Best Practice Guidelines. British Society for Human Genetics. En: www. cytogenetics.org.uk/info/ACC_QF-PCR Consultado el 10 de octubre de 2006.

Chen C, Chern S, Wang W. Rapid determination of zygosity and common aneuploidies from amniotic fluid cells using quantitative fluorescent polymerase chain reaction following genetic amniocentesis in multiple pregnancies. Hum Reprod. 2000; 5: 929-934.

Cirigliano V, Camadas P, Plaja A, Ordóñez E, Mediano C, Sánchez C et al. Rapid prenatal diagnosis of aneuploidías and zigosity in multiple pregnancies by amniocetesis with single insertion of the needle and quantitative fluorescent PCR. Prenat Diagn. 2003; 23: 629-633.

Valero R, Marfany A, Gil-Benso R, Ibáñez M, López-Pajares I, Prieto F et al. Molecular characterization of partial chromosome 21 aneuploidies by fluorescent PCR. J Med Genet. 1999; 36: 694-697.

Diego D, García M, Trujillo M, González C, Rodríguez de Alba M, Ayuso C et al. Application of quantitative fluorescent PCR with short tandem repeat markers to the study of aneuploidies in spontaneous miscarriages. Hum Reprod. 2005; 20:1235-1243.

Machatkova M, Brouckova A, Matejckova M, Krebsova A, Sperling K, Vorsanova S et al. QF-PCR examination of parental and meiotic origin of trisomy 21 in Central and Eastern Europe. J Histochem & Cytochem. 2005; 53: 371–373.

Pertl B, Kopp S, Kroisel P, Tului L , Brambati T, Adinolfi M. Rapid detection of chromosome aneuploidies by quantitative fluorescence PCR: first application on 247 chorionic villus samples. J Med Genet. 1999; 36:300–303.

Schmidt W, Jenderny J, Hecher K,Hackeloer B, Kerber S, Kochan L et al. Detection of aneuploidy inchromosomes X, Y, 13, 18 and 21 by QF-PCR in 662 selected pregnancies at risk. Mol. Hum. Reprod. 2000; 6: 855-860.

Cirigliano V, Ejarque M, Cañadas M, Lloveras E, Plaja A, Pérez A et al. Clinical application of multiplex quantitative fluorescent polymerase chain reaction (QF-PCR) for the rapid prenatal detection of common chromosome aneuploidías. Mol Hum Reprod. 2001; 7: 1001-6.

Cirigliano V, Voglino G, Camadas P, Marongiu A, Ejarque A, Ordóñez E et al. Rapid prenatal diagnosis of common chromosome aneuploidies by QF-PCR. Assesment on 18 000 consecutive clinical samples. Mol Hum Reprod. 2004. 10: 839-446.

Mann K, Fox S, Abbs S, Yau A, Scriven P, Docherty S et al. Development and implementation of a new rapid aneuploidy diagnostic service within the UK National Health Service and implications for the future of prenatal diagnosis. Lancet. 2001 358: 1057-61.

Ghosh S, Dey S. DNA Diagnosis of Down syndrome using polymerase chain reaction and polymorphic microsatellite markers. Int J Hum Genet. 2003; 3:17-20.

Lee M, Ryu H, Kim D, Lee B, Cho E, Yang E et al. Rapid prenatal diagnosis of Down syndrome using quantitative fluorescent PCR in uncultured amniocytes. J Korean Med Sci. 2004; 19: 341-4

Fang Z, Xin X, Yuan-Zhen Z, Xiao-bo S, Jian-hong P, Chun-Hong W et al. Rapid prenatal diagnosis of trisomy 21 by fluorescent quantitative multiplex polymerase chain reaction. Chin Med J. 2006; 119: 514-51

Brown L, Abigania M, Warburton D, Brown S. Validation of QF-PCR for prenatal aneuploidy screening in the United States. Prenat. Diagn 2006; 26: 1068-74

Primost I, Mincman J, García P, Coco I, Gismondi F, Neuspiller N et al. Determinación de aneuploidías por PCR fluorescente. Reproducción. 2007; 22: 69-86

Junho S, Belo H, Fontoura E, Sturzeneker R. Investigação genética dos abortamentos espontâneos pelo DNA. Rev Med Minas Gerais 2003; 13: 164-73

Castro-Volio I, Escalante G, Mora H, Guerra D, Sánchez L, Peña C. Cariotipo de células fetales en el diagnóstico prenatal en Costa Rica. Rev Biol Trop 1995; 43(1-3): 31-37

Castro-Volio I, Sander K, Vargas M, Sánchez L, Escalante G. Diagnóstico prenatal citogenético mediante amniocentesis durante los trimestres II y III de gestación en Costa Rica. Rev Biol Trop 2001; 49(3-4): 1227-1236

Castro-Volio I, Ortiz F. Cariotipos fetales mediante amniocentesis y cordocentesis en Costa Rica. Perinatol Reprod Hum. 2004;18: 187-198

Pertl B, Pieber D, Lercher A, Orescovic E, Haeusier M, Winter R et al. Rapid prenatal diagnosis of aneuploidy by quantitative fluorescent PCR on fetal samples from mothers at high risk for chromosome disorders. Mol Hum Reprod. 1999; 5: 1176-79.

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Publicado

2009-09-17

Cómo citar

Malespín Bendaña, W., Ortiz Morales, F., & Castro-Volio, I. (2009). Diagnóstico molecular de cromosomopatías fetales en Costa Rica. Acta Médica Costarricense , 51(4), 236-240. https://doi.org/10.51481/amc.v51i4.484